Métodos de descalcificación
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Antecedentes: El objetivo de este estudio fue comparar la descalcificación convencional y la asistida por microondas de hueso de oveja con y sin dientes, para detectar cualquier diferencia en la preservación de los detalles del tejido, la calidad de la tinción y la tasa de descalcificación.
Materiales y métodos: Veinticuatro especímenes consistentes en 12 bloques de molares mandibulares con su hueso circundante y 12 bloques de tejido óseo mandibular fueron distribuidos en dos grupos de descalcificación por microondas o de rutina, utilizando como agentes descalcificadores 5 ácido nítrico o fórmico. Además de la tasa de descalcificación, se utilizaron diversas variables para evaluar la calidad de la tinción y la conservación de los detalles del tejido, que se compararon entre los dos grupos mediante la prueba de Man-Whitney (P0,05).
Resultados: El tiempo hasta la descalcificación completa se redujo significativamente en las muestras tratadas con microondas en comparación con el método convencional, independientemente del agente descalcificador (P=0,025). Para ambos ácidos, la mayoría de las variables relacionadas con la calidad de la tinción y la conservación de los detalles del tejido fueron similares entre las técnicas (P0,05). Sin embargo, en general el rendimiento del ácido fórmico fue ligeramente inferior al del ácido nítrico, especialmente en el caso de las muestras que contenían tanto dientes como hueso.
Localización del hueso descalcificado
El hueso descalcificado se utiliza para el estudio de la médula ósea para diagnosticar tumores e infecciones y otros fines, una zona notable de la muestra de tejido está calcificada entonces, es imposible conseguir la muestra de tejido deseada sin la descalcificación inicial.
El hueso se compone de osteocitos, matrices de colágeno e hidroxiapatita cristalina , estos cristales se disuelven durante el proceso de Descalcificación y si se hace correctamente, la muestra de tejido óseo debe ser físicamente Similar al tejido conectivo fibroso después del proceso de Descalcificación desde el punto de vista de la densidad.
El tiempo requerido para la descalcificación depende del tipo de muestra, si la muestra es de médula ósea, el tiempo requerido es de una hora o si es una muestra de fémur, el tiempo requerido es de un mes. El aumento de la temperatura acelera el proceso pero puede dañar el tejido, así que hay que tener cuidado.
Para lograr resultados de alta calidad, es importante determinar el punto en el que se elimina todo el calcio del tejido es importante La continuación excesiva del proceso provoca daños en el tejido y la razón es el uso de ácidos fuertes Y el proceso incompleto provoca incapacidad en el seccionamiento.
Descalcificación en histopatología
La descalcificación ósea es el reblandecimiento de los huesos debido a la eliminación de los iones de calcio, y puede realizarse como técnica histológica para estudiar los huesos y extraer el ADN.[1][2] Este proceso también se produce de forma natural durante el desarrollo y el crecimiento de los huesos, y cuando no se inhibe, puede causar enfermedades como la osteomalacia.[3].
Dado que los huesos ricos en calcio son muy difíciles de estudiar, los científicos utilizan la descalcificación ósea para disponer de especímenes para sus investigaciones[4]. Por ejemplo, la descalcificación ósea se ha utilizado para examinar los niveles de cartílago y magnesio con el fin de comprender el deterioro de los huesos[1] Existen dos categorías de agentes descalcificadores para eliminar los iones de calcio: los agentes quelantes y los ácidos. Los ácidos se dividen a su vez en débiles (ácido pícrico, acético y fórmico) y fuertes (ácido nítrico y clorhídrico). Los ácidos ayudan a producir una solución de iones de calcio, mientras que los agentes quelantes absorben los iones de calcio. El agente quelante más utilizado es el ácido etilendiaminotetraacético (EDTA). La descalcificación es un procedimiento largo, ya que los trozos de hueso deben dejarse en el agente descalcificador durante días o semanas, dependiendo del tamaño del hueso. Existen numerosos métodos para comprobar cuándo se ha completado la descalcificación del hueso, como el examen radiológico, el análisis químico y la medición de la flexibilidad de la muestra. La descalcificación es necesaria para obtener secciones blandas del hueso utilizando un microtomo. Todas las secciones finas del hueso que se cortan pueden procesarse (véase el procesamiento de tejidos) como cualquier otro tejido blando del cuerpo.
Qué es la descalcificación
Los diagnósticos moleculares se están convirtiendo rápidamente en parte del estándar de atención a los pacientes con cáncer. Este enfoque basado en biomarcadores sirve para seleccionar a los pacientes que probablemente se beneficien de regímenes de tratamiento dirigidos y ayuda potencialmente a su inclusión en los ensayos clínicos adecuados.
El hueso es un lugar común y ocasionalmente el único sitio de metástasis o de toma de muestras. Sin embargo, las biopsias óseas presentan un desafío único para el diagnóstico molecular, ya que están sujetas a la descalcificación durante el procesamiento rutinario de la histología. Al ser el principal tejido conectivo estructural y de soporte, el hueso es duro y rígido. La inclusión de minerales en su matriz osteoide le confiere fuerza y rigidez. El tejido óseo está formado por tres componentes principales: minerales o componente cristalino (70%), matriz orgánica extracelular o colágeno flexible (30%) y células de la médula. El componente cristalino del hueso está compuesto principalmente por calcio, que interfiere en el proceso histológico normal e impide la sección normal de los bloques. El objetivo de la descalcificación es eliminar el calcio inorgánico de los tejidos calcificados y hacer que el hueso sea flexible y fácil de cortar para la evaluación patológica.
